تشخیص غیر تهاجمی ژنوتایپ RhD جنین انسان از نمونه سرم مادران RhD- منفی با استفاده از Hemi-nested PCR

Authors

  • دکتر تقی طریحی,
  • فرزانه رهمدانی,
Abstract:

  چکید ه   سابقه و هدف   آنتی‌ژن RhD در ایجاد بیماری‌های همولیتیک نوزادان نقش مهمی دارد و از آن‌جایی که تعیین RhD جنین با استفاده از روش‌های تهاجمی مانند آمنیوسنتز، خطراتی را برای مادر و جنین به دنبال خواهد داشت، در این پژوهش تلاش گردید تا ژنوتایپ RhD جنین از DNA آزاد جنینی موجود در سرم مادران باردار، به صورت غیر تهاجمی و با استفاده از روش Hemi-nested PCR تعیین گردد.   مواد وروش‌ها   مطالعه انجام شده از نوع تجربی (experimental) بود. نمونه‌های خون 45 مادر باردار RhD - منفی که همسر RhD - مثبت داشتند جمع‌آوری شد و DNA آزاد سرم آن‌ها با روش فنل کلروفرم استخراج گردید. با استفاده از آغازگرهای اختصاصی و در دو دور PCR ، قطعه‌ای از اگزون 10 ژن RhD تکثیر شد. برای تایید نتایج منفی حاصله بر روی نمونه‌های مادران باردار حامل جنین RhD - منفی، با استفاده از آغازگرهای اختصاصی قطعه‌ای از ژن دیگری به نام RhCE تکثیرگردید.   یافته‌ها   پس از تولد، پیگیری انجام شده در ردیابی نتایج سرولوژیکی بند ناف نوزادان و ارزیابی نتایج حاصل از این پژوهش مشخص نمود که در 37 مورد از 41 نمونه قابل پیگیری، RhD جنین به میزان 45/95% به درستی تعیین شده ‌است. نتایج مربوط به 4 نمونه باقیمانده شامل یک مورد منفی کاذب و سه مورد مثبت کاذب بوده‌ است.   نتیجه گیری   این پژوهش نشان داد که برای تشخیص پیش از تولد گروه خونی RhD جنین به روش غیر تهاجمی و با کمترین احتمال خطر برای نوزاد، نمونه‌های سرمی مادران بسیار مناسب است. در این ارتباط استفاده از روش‌های جدید و حساس مولکولی مانند روش Hemi-nested PCR و به دست‌آوردن درصد بالایی از میزان تشخیص ژنوتایپ RhD این امیدواری را به ارمغان می‌آورد که با حذف تمام عوامل مداخله‌گر و تکمیل این روش، می‌توان این تشخیص را با اطمینان بالایی در کلینیک به کار برد. کلمات کلیدی : بارداری، سرم ، RhD ، RhCE ، PCR

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تشخیص غیر تهاجمی ژنوتایپ rhd جنین انسان از نمونه سرم مادران rhd- منفی با استفاده از hemi-nested pcr

چکید ه   سابقه و هدف   آنتی ژن rhd در ایجاد بیماری های همولیتیک نوزادان نقش مهمی دارد و از آن جایی که تعیین rhd جنین با استفاده از روش های تهاجمی مانند آمنیوسنتز، خطراتی را برای مادر و جنین به دنبال خواهد داشت، در این پژوهش تلاش گردید تا ژنوتایپ rhd جنین از dna آزاد جنینی موجود در سرم مادران باردار، به صورت غیر تهاجمی و با استفاده از روش hemi-nested pcr تعیین گردد.   مواد وروش ها   مطالعه انجام...

full text

تعیین ژنوتیپ RHD جنین در مادران RhD منفی با استفاده از Real Time PCR

چکیده سابقه و هدف آنتی‌ژن RhD ، نقش مهمی را در ایجاد بیماری همولیتیک جنین و نوزاد ایفا می‌کند. هدف از انجام این مطالعه، تعیین ژنوتیپ RhD جنین در پلاسمای مادران RhD منفی و هم چنین تعیین جنسیت جنین در هفته‌های نخست بارداری با استفاده از روش Real Time PCR بود. مواد و روش‌ها در این مطالعه توصیفی، 21 نمونه DNA ، از پلاسمای مادران باردارRhD  منفی که در سنین بارداری بین 8 تا 39 هفته قرار داشتند...

full text

تعیین ژنوتیپ rhd جنین در مادران rhd منفی با استفاده از real time pcr

چکیده سابقه و هدف آنتی ژن rhd ، نقش مهمی را در ایجاد بیماری همولیتیک جنین و نوزاد ایفا می کند. هدف از انجام این مطالعه، تعیین ژنوتیپ rhd جنین در پلاسمای مادران rhd منفی و هم چنین تعیین جنسیت جنین در هفته های نخست بارداری با استفاده از روش real time pcr بود. مواد و روش ها در این مطالعه توصیفی، 21 نمونه dna ، از پلاسمای مادران باردارrhd  منفی که در سنین بارداری بین 8 تا 39 هفته قرار داشتند استخرا...

full text

Molecular RHD screening of RhD negative donors can replace standard serological testing for RhD negative donors.

This work aims to assess the value of a generalized molecular RHD screening strategy which could replace routine serological screening of weak D by indirect antiglobulin test. Three independent studies were performed at the two Blood Transfusion Services Berne and Zurich. Donors investigated were 652 RhD negative, but RhC and/or RhE positive, 17,391 mainly Rhccee, and 8200 with normal RhCcEe ph...

full text

تعیین غیر تهاجمی جنسیت جنین از نمونه ی خون مادران باردارناقل هموفیلی با استفاده از real-time pcr

کشف dna جنینی در خون مادر در سال 1997 امکان های جدیدی برای تشخیص غیر تهاجمی قبل از تولد فراهم و زمینه ی مهمی از مطالعات را در تشخیص ژنتیکی قبل از تولد به خود اختصاص داده است. یک کاربرد احتمالی آن تعیین جنسیت جنین برای زوج های در معرض ریسک بیماری های وابسته به x مانند بیماری هموفیلی است. تشخیص معمول جنسیت جنین در سه ماهه ی اول بارداری هم اکنون بر پایه ی شیوه های تهاجمی است که ممکن است دارای ریسک...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 3  issue 2

pages  93- 100

publication date 2006-06

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023